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1、單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,月季花藥培養,月季的花藥培養專業專家講座,第1頁,花中皇后月季又稱“月月紅”，,自然花期,5至11月,，開花連續不停，,通常扦插就能夠成活,。,月季的花藥培養專業專家講座,第2頁,課題背景,利用植物組織培養技術能夠實現,優良品種快速繁殖，保持遺傳性狀一致,。但這種方法同時也存在著一定缺點繁殖出來新植株往往無法取得一些新性狀。,1964年，印度科學家在培養毛葉曼陀羅,花藥,時，首次取得了由花藥中花粉粒發育而來單倍體植株，這個,試驗說明,生殖細胞,和,體細胞,一樣，在離體條件下也含有發育成完整植株潛能。,單倍體
2、育種不但,縮短了育種周期,，也為新品種培育開辟了新路徑。,月季的花藥培養專業專家講座,第3頁,知識回顧:,單倍體育種過程？,花藥離體培養（,N）,單倍體植株（,N）,秋水仙素處理，使染色體翻倍,植株（,2N）,特點：,1.顯著縮短育種年限,2.后代植株都為純合子。,正常植株（,2N）,月季的花藥培養專業專家講座,第4頁,觀察P37圖36，和減數分裂比較，你能指出對應時期嗎？又有何特點？,閱讀“被子植物花粉發育”，思索以下問題：,被子植物花結構是怎樣？,被子植物花粉發育要經歷哪些階段？,一、基礎知識,月季的花藥培養專業專家講座,第5頁,（一）被子植物花粉發育,花絲,花藥：,囊狀結構，內有很多花粉
3、,1.雄蕊,雄蕊,雌蕊,月季的花藥培養專業專家講座,第6頁,2.花粉概念:由,花粉母細胞,經過,減數分裂,形成,單倍體生殖細胞,.,月季的花藥培養專業專家講座,第7頁,3.花粉發育過程,減數分裂,有絲分裂,月季的花藥培養專業專家講座,第8頁,花粉粒形成,花粉母細胞,（小孢子母細胞）,減數分裂,（四分體時期）,進入,單核期,有絲,分裂,（單核居中期）,4個小孢子,1個小孢子,（單核靠邊期）,1個小孢子,花粉管細胞核,生殖細胞核,雙核期,花粉粒,營養細胞,生殖細胞,有絲,分裂,精子,精子,月季的花藥培養專業專家講座,第9頁,花粉是,經過,分裂而形成，所以，花粉是,倍體_,細胞,經歷時期：,時期、,
4、期、,期,小孢子母細胞,減數,單,生殖,小孢子四分體,單核,雙核,月季的花藥培養專業專家講座,第10頁,知識拓展,被子植物花粉發育過程中四分體時期是指4個單倍體細胞連在一起時期；,減數分裂過程中四分體時期是指同源染色體配對后，一對同源染色體含有四條染色單體階段。,被子植物花粉發育過程中四分體時期與減數分裂過程中四分體時期含義,月季的花藥培養專業專家講座,第11頁,在正常情況下，一個小孢子母細胞能夠產生,個精子；在一枚花藥中能夠產 生,個花粉。,8,許多,營養細胞,在花粉萌發過程中作用：,控制花粉萌發并提供營養,兩個精子和一個營養核基因型,。,相同,注意：,月季的花藥培養專業專家講座,第12頁,
5、A.花粉是花粉母細胞經有絲分裂形成,B.花粉發育要經歷小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段,C.花粉發育經歷四分體時期與減數分裂四分體時期含義相同,D.花粉母細胞形成花粉粒中精子過程是一系列減數分裂過程,1.以下關于被子植物花粉形成，說法正確是,B,月季的花藥培養專業專家講座,第13頁,（二）產生花粉植株兩種路徑,閱讀P38教材內容，說出產生花粉植株兩種路徑及原因,1.產生花粉植株兩條路徑,2.產生花粉植株含有兩條路徑,原因,：,花粉,花粉,從芽,從芽,移栽,脫分化,誘導,胚狀體,愈傷組織,分化,再分化,生根,主要取決于培養基中,種類及其,配比。,激素,濃度,月季的花藥培養專業專家講座,第1
6、4頁,體細胞胚（胚狀體）：,在組織培養過程中，一些體細胞在形態上轉變為與合子發育成胚非常相同結構，發育過程亦與合子胚類似，被稱為,體細胞胚（胚狀體）,。,月季的花藥培養專業專家講座,第15頁,（三）影響花藥培養原因,閱讀教材P3839頁，找出哪些原因能夠影響花藥培養？,1、材料選擇,不一樣種類植物誘導成功率不一樣。,同一個植物，親本植株生理情況對誘導成功率有直接影響。,適當花粉發育時期,：花期早期時花藥最正確。,選擇最適當花粉發育時期,月季的花藥培養專業專家講座,第16頁,為何不選擇使用單核期之前或之后花藥接種？,單核期之前花藥，質地幼嫩，極易破碎。,單核期之后花藥，花瓣已經有些松動，又給材料
7、消毒帶來困難。,想一想,月季的花藥培養專業專家講座,第17頁,為何花瓣松動會給材料消毒帶來困難？,答：花瓣松動后，微生物就可能侵入到花藥，給材料消毒帶來困難。,為何花瓣松動會給材料消毒帶來困難？,討論：,月季的花藥培養專業專家講座,第18頁,花藥培養所采取培養基各成份中植物生長調整劑水平和配比起決定作用。,誘導愈傷組織或胚狀體產生培養基：廣泛使用 2，4-D、IAA；,誘導分化培養基常除去2，4-D而以IBA代之。,2.培養基組成：,月季的花藥培養專業專家講座,第19頁,親本植株生長條件、材料低溫預處理、接種密度等對誘導成功率都有一定影響。,3.其它原因：,月季的花藥培養專業專家講座,第20頁
8、,2.在月季花藥培養成單倍體植株過程中，選擇哪個時期最易成活（）,A.單核期前花藥,B.單核期后花藥,C.單核期花藥,D.雙核期,C,月季的花藥培養專業專家講座,第21頁,3.月季花藥培養時花粉粒最好是（）,A、四分體時期 B、單核居中期,C、單核靠邊期 D、二核或三核花粉粒,C,月季的花藥培養專業專家講座,第22頁,材料選取,試驗操作流程包含：,（一）_,；,（二）,_；,（三）_。,材料消毒,接種和培養,二、實驗操作,月季的花藥培養專業專家講座,第23頁,1選擇花藥時普通經過_確定花粉發育時期，此時需要對花粉細胞核進行染色，最慣用染色劑是_和_，它們分別能夠將細胞核染成,_色和_色。,（一
9、）材料選取,焙花青-鉻礬,閱讀“（一）材料選取”，回答以下問題：,鏡檢,醋酸洋紅,藍黑,紅,月季的花藥培養專業專家講座,第24頁,（二）材料消毒,閱讀“（二）材料消毒”，填寫以下流程圖：,花蕾,（,_,）,清洗,吸干水分,消毒24min,沖洗35次,浸泡約30s,（,_,）,（,_,）,（,_,）,（,_,）,70%酒精,無菌吸水紙,無菌水,無菌水,1%氯化汞溶液,1%次氯酸鈣溶液,飽和漂白粉溶液,1%氯化汞溶液,說明：,用于培養花藥，實際上多數未熟，因為它外面有花萼、花瓣或穎片保護，通常處于無菌狀態，所以只要將整個花蕾或幼穗消毒即可。,月季的花藥培養專業專家講座,第25頁,（三）接種和培養,
10、閱讀“（三）,接種和培養,”，,回答以下問題：,1.培養：溫度為_,，幼苗形成之前,（需要、不需要）光照。,25,2.經過愈傷組織形成植株，經常會出現,_改變，因而需要判定和篩選。,染色體組數目,月季的花藥培養專業專家講座,第26頁,為何經過愈傷組織形成植株會發生染色體倍性改變？,主要原因是營養核和生殖核融合造成,。,想一想,月季的花藥培養專業專家講座,第27頁,4.關于花藥培養產生花粉植株路徑，以下敘述錯誤是,(,),A,花粉可經過愈傷組織發育成植株,B,花粉可經過胚狀體深入分化成植株,C,主要由培養基中激素種類及用量決定路徑,D,產生胚狀體是花藥離體培養中特有路徑,D,月季的花藥培養專業專
11、家講座,第28頁,5.關于月季花藥培養技術與菊花組織培養技術不一樣，以下說法不正確是(),A花藥培養需發育時期適宜花蕾,B花藥培養對培養基配方要求更為嚴格,C培養基配制方法完全不一樣,D花藥裂開后長出愈傷組織或釋放胚狀體要及時換培養基,C,月季的花藥培養專業專家講座,第29頁,6.,下面是被子植物花粉發育過程簡略表示，請回答：,小孢子母細胞,雙核期,(1),是指,_,時期，由小孢子母細胞經,_,分裂形成。,(2),和,分別是指,_,期和,_,期，該期細胞特點是,_,。,(3)1,個花粉母細胞經過分裂最多能形成,_,個花粉粒，,_,個細胞核。,(4)雙核期兩個核分別叫_核和_核。,(5)在進行花
12、藥組織培養時選擇_段培養成功率最高。,四分體,減數,單核居中,單核靠邊,含濃厚原生質,4,12,生殖細胞,花粉管細胞,月季的花藥培養專業專家講座,第30頁,7.將基因型為AaBb小麥花粉細胞經過無菌操作接入含有全部營養成份培養基試管中，在一定條件下誘導形成試管幼苗，其過程如圖：,小麥花粉細胞愈傷組織叢芽生根植株,（1）發育成植株稱為_，基因型有_。,（2）小麥形成花粉細胞分裂方式是_，花粉發育成植物體過程中細胞分裂方式是_。,（3）若得到可育植株，需要用_對_（填符號）進行處理，所取得植株基因型可能是_。,單倍體,AB、Ab、aB、ab,月季的花藥培養專業專家講座,第31頁,答案：,（1）單倍
13、體AB、Ab、aB、ab,（2）減數分裂和有絲分裂有絲分裂,（3）秋水仙素AABB、AAbb、aaBB、aabb,（4）A、B、D,月季的花藥培養專業專家講座,第32頁,8、基因型為AaBb水稻（條染色體）花藥經過無菌操作，接入試管后，在一定條件下培養成試管苗。,（）愈傷組織是花粉細胞分裂形成不規則細胞團，愈傷組織必須從培養基中取得（）（）和小分子有機物等營養物質。,（）要促進花粉細胞分裂分化，培養基中應有（）（）兩種激素。,愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根，由芽發育成葉莖。這一過程必須給予光照，其原因是（）利用光能制造有機物促進試管苗生長發育。,（）試管苗細胞核中有（）條脫氧核苷酸鏈。試管
14、苗基因型有：,水,無機鹽,生長素,細胞分裂素,葉,24,AB Ab aB ab,月季的花藥培養專業專家講座,第33頁,植物組織培養技術與花藥培養技術,異同點,項目,相同點,不一樣點,植物組織培養技術,離體植物組織經脫分化形成愈傷組織，再分化成叢芽，誘導出根，然后進行移栽。,外植體為體細胞，染色體數,無,需加倍。,花藥培養技術,取材為花藥，培養為單倍體幼苗，植株弱小，高度不育，必須用秋水仙素處理，使染色體加倍，恢復正常植株染色體數，而且為純種。,月季的花藥培養專業專家講座,第34頁,9.草莓生產上傳統繁殖方式易將所感染病毒傳輸給后代，造成產量降低。品質變差。利用微型繁殖技術能夠培育出無病毒幼苗。
15、草 莓微型繁殖基本過程以下：,外植體 愈傷組織 芽、根 植株,請回答：,（1）微型繁殖培育無病毒草莓苗時，普通選取_ 作為外植體，其依據是_,_,。,（2）在過程中，慣用MS培養基主要成份包含大量元素、微量元素和_，在配制好培養基中，經常需要添加_，有利于外植體開啟細胞分裂形成愈傷組織。接種后25d，若發覺外植體邊緣局部污染，原因可能是_,。,（3）在過程中，愈傷組織在誘導生根培養基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是_ 。,莖尖、根尖,莖尖、根尖不含病毒,有機物,植物激素,外植體消毒不徹底,培養基中生長素類物質和細胞分裂素類物質用量比值偏低,月季的花藥培養專業專家講座,第35頁,教材P40練習1.,F2代紫色甜玉米基因型組成可能為Aasusu或AAsusu。假如利用常規育種方法，將F2代中紫色甜玉米與白色甜玉米（aasusu）進行測交，能夠選擇出基因型為AAsusu純種紫色甜玉米。但這種方法比較繁瑣，耗時也較長，需要最少三年選種和育種時間。,假如利用花藥培養技術，在F1代產生花粉中就可能有Asu組合，再將花粉植株進行染色體加倍，就能夠直接得到紫色甜玉米純合體（AAsusu）。這種方法能夠大大縮短育種周期。,月季的花藥培養專業專家講座,第36頁,
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